2018/05/28 Last update
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抗体を用いた免疫染色 immunostaining で留意すべきことは，以下の3点である（1）。
- 目的タンパク質の抗原性の保持（抗体に結合できる状態が保たれているかどうか）
- 目的タンパク質の発現部位の保持（他の場所に移動していないかどうか）
- 組織の形態の保持
組織の一般的な固定法は以下の通り（1）。
- 未固定凍結: 未固定のまま OCT コンパウンドに包埋して凍結切片を作る。
- 固定凍結: パラホルムアルデヒド PFAなどで固定したのち OCT コンパウンドに包埋し，凍結切片を作る。
- パラフィン: パラホルムアルデヒド PFA などで固定したのちパラフィン包埋し，切片を作る。
- 形態保持に優れるが，抗原性の保持が悪い。パラフィン切片に使用可能な抗体を選んで使う。
- 標本は常温で保存が可能である。
固定液には，大きく分けてアルデヒド系と有機溶剤系がある（1）。前者は低分子の不溶化や形態保持に優れるが，タンパク質やペプチドの抗原保持に難点がある。後者は脱水作用があり，組織が収縮してしまう可能性がある。高分子の抗原保持に優れる。
おそらく，最も汎用されているのが 4% パラホルムアルデヒドである。
4% パラホルムアルデヒド（10% ホルマリン）
> ホルマリンはパラホルムアルデヒドの35 - 38%溶液であるため，両者の組成はほぼ同じである。